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關于纖維素 DE-52的處理只需要簡單的幾步
  • 發布日期:2022-03-29      瀏覽次數:203
    •   纖維素 DE-52為中等堿性陰離子交換劑,柱層析用于吸附劑,用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等各種生物高分子。
       
        纖維素DE-52提取法純化多克隆抗體
        該法提取IgG簡便,既可小量提取,也可大量制備。
        1、批量提取法,稱取DEAE-纖維素(DE52)50g,置于1000ml燒杯中,先以蒸餾水漂浮除去細顆粒,再經酸堿處理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸鹽緩沖液(PB)平衡。將水分抽干,或用布氏濾斗(內放兩層濾紙)過濾,收集濕纖維素,以降低其離子強度。按1ml血清加濕重5g DE52,經過充分攪拌,置4℃吸附1h。上清液可再如此處理一次,即獲得較純的IgG。該法提取IgG簡便,既可小量提取,也可大量制備。
        2、Tris-Cl離子交換層析法。
       
        纖維素 DE-52處理方法:
        關于纖維素 DE-52的處理只有簡單的幾步,如下:
        1、先將干粉的纖維素浸泡在蒸餾水中,一段時間大約3小時左右,我偏愛這個時間,去除雜質,抽干一下。
        2、再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小時,用去離子水洗凈至PH中性,并抽干。
        3、將抽干的纖維素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小時,用去離子水洗至中性,抽干。即可用了。
        對于用過的纖維素,可以重復利用多次,但需要經過再生處理后才可以使用。再生處理可先用高濃度NaCl(1-2 mol/L)過柱沖洗柱床,以除去纖維素 DE-52陰離子交換纖維所吸附的成份。然后,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH處理,處理方法與預處理完全相同。
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